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ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果不理想怎么辦
發(fā)布時(shí)間： 2021-10-21 點(diǎn)擊次數(shù)： 2357次讓大部分ELISA實(shí)驗(yàn)人員頭疼的問題，就是在ELISA實(shí)驗(yàn)后結(jié)果不理想。那碰到這種情況我們應(yīng)該怎么解決呢？其實(shí)做科研實(shí)驗(yàn)，就是這樣在不斷探索中尋求真理。很難有人能*的實(shí)驗(yàn)成功。在做實(shí)驗(yàn)時(shí)那些千萬不能忽視的一些小細(xì)節(jié)，還有我們?cè)谧鰧?shí)驗(yàn)過程中能夠盡量避免一些誤區(qū)。我們來一起簡(jiǎn)單了解下影響ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果不理想的因素有哪些，然后盡量在實(shí)驗(yàn)的時(shí)候避開這些誤區(qū)。
1. 操作前應(yīng)對(duì)實(shí)驗(yàn)的物理參數(shù)有充分的了解，如環(huán)境溫度(保持在18 c～25℃)、反應(yīng)孵育溫度和孵育時(shí)間、洗滌的次數(shù)等，要先查看水育箱溫度，是否符合要求。
2. 正確使用加樣器加樣器應(yīng)垂直加入標(biāo)本或試劑，避免刮擦包被板底部。加樣過程中避免液體外濺，血清殘留在反應(yīng)孔壁上，加樣器吸頭要清洗干凈，避免污染，加樣次序要與說明書一致，否則可導(dǎo)致結(jié)果錯(cuò)誤，實(shí)驗(yàn)重復(fù)性差。
3. 手工洗板加洗液時(shí)沖擊力不要太大，洗滌次數(shù)不要超過說明書推薦的洗滌次數(shù)，洗液在反應(yīng)孑l內(nèi)滯留的時(shí)間不宜太長(zhǎng)。不要使洗液在孑l間竄流，造成孔問污染，導(dǎo)致假陰性或假陽(yáng)性。
4. 要保證加液量一致 我們?cè)谑褂脮r(shí)感覺滴瓶加液不如加樣器好，滴瓶不易控制加液量不準(zhǔn)，造成顯色不統(tǒng)一，判斷錯(cuò)誤。
5. 顯色液量不可過多 加樣的工作環(huán)境不能處于陽(yáng)光直射的環(huán)境下，加顯色系統(tǒng)后要避光反應(yīng)，顯色液量不能過多，以免顯色過強(qiáng)。ELISA試劑盒的影響因素應(yīng)選用有國(guó)家批準(zhǔn)文號(hào)，質(zhì)量靠得住的產(chǎn)品，不能圖便宜，忽視質(zhì)量保證。試劑應(yīng)妥善保存于4℃冰箱內(nèi)，在使用時(shí)先平衡至室溫，不同批號(hào)的試劑組分不宜交叉使用。試劑開啟后要在一周內(nèi)用完，剩余的試劑下次用時(shí)應(yīng)先檢查是否變質(zhì)，顯色劑如被污染變色將造成全部顯色，導(dǎo)致錯(cuò)誤結(jié)果。